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元素分析儀對(duì)比凱氏定氮法在3種食用菌蛋白質(zhì)含量分析

日期:2024-10-11 00:07
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摘要:食用菌是一種天然食物,具有獨(dú)特風(fēng)味,廣受人們喜愛(ài)。食用菌含有豐富蛋白質(zhì)、纖維素、多糖及微量元素,且脂肪含量較低,可作為減脂食品。

食用菌是一種天然食物,具有獨(dú)特風(fēng)味,廣受人們喜愛(ài)。食用菌含有豐富蛋白質(zhì)、纖維素、多糖及微量元素,且脂肪含量較低,可作為減脂食品。

 

蛋白質(zhì)是人體重要的物質(zhì)基礎(chǔ)。目前常用的蛋白質(zhì)檢測(cè)方法為凱氏定氮法和元素分析法,通過(guò)測(cè)定物質(zhì)中的氮素含量,進(jìn)而換算出樣品的粗蛋白含量。

元素分析儀檢測(cè)法常用于檢測(cè)C、H、N、S等非金屬元素,高溫環(huán)境中,樣品通過(guò)氧化還原反應(yīng)充分燃燒分解,待測(cè)樣品中的無(wú)機(jī)金屬元素被轉(zhuǎn)換成氣態(tài)物質(zhì),去除非檢測(cè)氣體(如揮發(fā)性的鹵素氣體),被檢測(cè)的氣態(tài)物質(zhì)在載氣氬氣的作用下,進(jìn)入指定分離單元。依據(jù)色譜法原理,將被測(cè)樣品的混合組分載入氣相色譜柱中,根據(jù)單組分氣體在色譜柱中流出的時(shí)間(即保留時(shí)間),按N、C、H、S順序依次分離;由熱導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)相應(yīng)的氣體,將數(shù)據(jù)傳入計(jì)算機(jī),并自動(dòng)算出樣品中不同元素的含量。樣品含氮量乘以換算系數(shù)6.25,即為檢測(cè)樣品的蛋白質(zhì)含量。此法具有無(wú)需樣品前處理、分析速度快及污染物較少等特點(diǎn),且可檢測(cè)樣品中全部氮素含量,包括一些硝態(tài)氮等非蛋白質(zhì)氮素量,是新興的檢測(cè)樣品粗蛋白含量的方法。

 

凱氏定氮法是檢測(cè)蛋白質(zhì)含量的傳統(tǒng)技術(shù),符合GB5009.5—2016《食品安國(guó)內(nèi)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》的要求,其原理為用硫酸分解樣品中有機(jī)物,使含氮物質(zhì)轉(zhuǎn)化成硫酸銨,后加堿蒸餾,再用鹽酸滴定,可得出樣品含氮量,此過(guò)程中的強(qiáng)酸與堿液會(huì)產(chǎn)生污染,此外滴定過(guò)程易出現(xiàn)誤差。

 

元素分析儀檢測(cè)3種食用菌樣品中蛋白質(zhì)含量

稱取食用菌(干品)樣品(5.00±0.25)mg,用錫紙包裹壓實(shí),置于樣品盤(pán)中。打開(kāi)儀器、氣閥以及與元素分析儀相連的計(jì)算機(jī),設(shè)定程序即可自動(dòng)檢測(cè),計(jì)算機(jī)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的校正曲線,自動(dòng)計(jì)算待測(cè)樣品蛋白質(zhì)含量。每個(gè)樣品3次重復(fù),并以L-胱氨酸為基準(zhǔn)物質(zhì)做3次對(duì)照檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果的平均值即是樣品的蛋白質(zhì)含量,**計(jì)算其變異系數(shù)(RSD)。



凱氏定氮法檢測(cè)3種食用菌樣品中蛋白質(zhì)含量

稱取食用菌(干品)樣品1.0~2.0g,放入消化管,添加適量的濃硫酸、硫酸銅和硫酸鉀,然后將消化管置于消化爐中。待食用菌樣品消化好后,定容至100mL。取出定容后的稀釋液10mL,放入分析管,采用意大利VELP凱氏定氮儀UDK159,檢測(cè)樣品蛋白質(zhì)含量。每個(gè)樣品重復(fù)檢測(cè)3次,檢測(cè)結(jié)果的平均值即是樣品的蛋白質(zhì)含量,**計(jì)算其變異系數(shù)(RSD)。

由表1可知,元素分析法的RSD在0.56%~1.75%,凱氏定氮法的RSD在2.23%~2.96%,均小于5%,說(shuō)明2種方法在檢測(cè)3種食用菌蛋白質(zhì)含量具有較高的準(zhǔn)確度,但元素分析法更**。凱氏定氮法檢測(cè)3種食用菌的含氮量均低于元素分析法,這可能是凱氏定氮法只能檢測(cè)食用菌中能夠轉(zhuǎn)化為銨態(tài)氮的有機(jī)物含氮量,不能檢測(cè)轉(zhuǎn)化成硝態(tài)氮的蛋白質(zhì),而元素分析法為高溫加熱,可氧化分解所有含氮物質(zhì),食用菌中還含有微量的硝態(tài)氮等形式的氮。此外,凱氏定氮法的消化和蒸餾過(guò)程中均存在氮流失,所以,元素分析法檢測(cè)的含氮量略高于凱氏定氮法,但兩種方法測(cè)定結(jié)果比較相近。

 

1元素分析法與凱氏定氮法檢測(cè)3種食用菌含氮量

采用元素分析儀檢測(cè)供試3種食用菌樣品蛋白質(zhì)含量數(shù)據(jù)**,具有樣品無(wú)需前處理、樣品需求量少、測(cè)定速度快、無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)。因此,檢測(cè)猴頭菇、平菇、香菇的蛋白質(zhì)含量時(shí),可采用元素分析法替代凱氏定氮法。

 


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