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人參根、莖、葉蛋白質(zhì)含量差異分析

日期:2024-11-15 22:57
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摘要:人參根中含有大量具有生物活性的多肽和人參蛋白。二維電泳技術(shù)已證明,人參中含有人參蛋白質(zhì)300余種,其中部分水溶性蛋白質(zhì)已被證明具有抗輻射、抗病毒、抗**、抗休克等方面的作用。人參是多年生植物,每年可以收獲大量的人參莖、葉,人參莖、葉制品具有一定的市場(chǎng)前景。杜馬斯燃燒法與凱氏定氮法相比,更加簡(jiǎn)單快速,可用于人參蛋白質(zhì)含量測(cè)定,采用杜馬斯燃燒法測(cè)定了人參根、莖、葉的蛋白質(zhì)含量,可以作為開(kāi)發(fā)人參莖、葉產(chǎn)品的理論基礎(chǔ)。

自古人參就有百草**的美譽(yù)。2002年,衛(wèi)生部《關(guān)于進(jìn)一步規(guī)范保健品原料管理的通知》[衛(wèi)法監(jiān)發(fā)(2002)51號(hào)]把人參(包括人參、人參葉、人參果)列入可用保健品食品原料的名單后,人參根、莖、葉正式作為保健品原料使用。目前,市場(chǎng)上人參類的保健品已有上百種,包括人參酒、人參茶、人參口服液、人參膠囊、人參含片等。2012年,衛(wèi)生部批準(zhǔn)人參可以作為新資源食品使用后,人參根、莖、葉在食品、保健品的應(yīng)用將有更廣闊的前景。

 

人參根中含有大量具有生物活性的多肽和人參蛋白。二維電泳技術(shù)已證明,人參中含有人參蛋白質(zhì)300余種,其中部分水溶性蛋白質(zhì)已被證明具有抗輻射、抗病毒、抗**、抗休克等方面的作用。人參是多年生植物,每年可以收獲大量的人參莖、葉,人參莖、葉制品具有一定的市場(chǎng)前景。杜馬斯燃燒法與凱氏定氮法相比,更加簡(jiǎn)單快速,可用于人參蛋白質(zhì)含量測(cè)定,采用杜馬斯燃燒法測(cè)定了人參根、莖、葉的蛋白質(zhì)含量,可以作為開(kāi)發(fā)人參莖、葉產(chǎn)品的理論基礎(chǔ)。

 

01材料與試劑

在撫松縣榆樹(shù)鄉(xiāng)參場(chǎng),隨機(jī)選取6個(gè)樣品采摘點(diǎn),每個(gè)點(diǎn)隨機(jī)抽取5組6年生人參的根、莖、葉作為試驗(yàn)材料。共計(jì)30組人參根、莖、葉樣品。

 

EDTA(意大利VELP公司)。CN802杜馬斯定氮儀(意大利VELP公司)

02測(cè)試方法

當(dāng)燃燒反應(yīng)器溫度達(dá)1030℃以上、還原反應(yīng)器溫度達(dá)650℃以上、氦氣(純度≥99.99%)壓力達(dá)200kPa以上、氧氣(純度≥99.99%)壓力達(dá)250kPa以上及氮?dú)猓兌取?9.99%)壓力達(dá)300kPa以上時(shí),自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè)。

 

分別稱取EDTA標(biāo)品0、12.2、21.7、30.1、41.2、52.8、62.4、75.4、82.4、93.3、100.3、113.6、122.6mg,用錫箔紙包好,經(jīng)制樣器制樣后檢測(cè),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以總氮質(zhì)量(mg)為橫坐標(biāo)、峰面積(mv×s)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。曲線方程:

 

鮮參樣品經(jīng)洗刷瀝水后置于50℃烘箱內(nèi)干燥,粉碎后過(guò)80目篩,密封留存待用。以EDTA作為檢測(cè)時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。在測(cè)定前,所有樣品以及EDTA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均在70℃烘箱內(nèi)再次干燥72h,置于干燥器內(nèi),待測(cè)。準(zhǔn)確稱取干粉樣品,用錫箔紙包好,壓縮空氣。

以標(biāo)準(zhǔn)品EDTA作為樣品,在上述測(cè)定條件下連續(xù)測(cè)定11次,RSD值為0.317%(n=11),結(jié)果表明,儀器精密度良好。

隨機(jī)選取一個(gè)樣品的根、莖、葉,分別重復(fù)測(cè)定6次,統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果,數(shù)據(jù)均符合X∈X±2s,根蛋白質(zhì)含量的平均值為15.851%,RSD為0.322%;莖蛋白質(zhì)含量的平均值為8.561%,RSD為0.341%;葉蛋白質(zhì)含量的平均值為12.704%,RSD為0.326%。說(shuō)明該試驗(yàn)方法的重現(xiàn)性良好。

取已知含量的人參根、莖、葉粉末作為樣品,各稱取2個(gè)樣,分別加入EDTA0.8、2.4、4.6、7.2、9.0、10.4mg。制樣后按照“2.1”項(xiàng)下條件測(cè)定,統(tǒng)計(jì)結(jié)果,平均回收率達(dá)99.83%。

30組樣品制備完成后,置于自動(dòng)進(jìn)樣盤上。按照“2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)行蛋白質(zhì)含量測(cè)定,每個(gè)樣品平行測(cè)定3次。采用杜馬斯定氮儀可自動(dòng)計(jì)算出含氮量,運(yùn)用公式蛋白質(zhì)含量=含氮量×6.25計(jì)算出蛋白質(zhì)含量,蛋白質(zhì)含量為3次平行測(cè)定的平均值。利用Excel及SAS9.2統(tǒng)計(jì)系統(tǒng)中的單因素方差分析程序?qū)Φ鞍踪|(zhì)含量進(jìn)行方差分析和單因素比較。

6個(gè)樣品組間根、莖中蛋白質(zhì)含量無(wú)**差異;葉中樣品1、4、5、6間無(wú)**差異,但**高于樣品2,樣品1、3、4、5間無(wú)**差異,樣品2、3間無(wú)**差異。

6個(gè)樣品點(diǎn)間人參蛋白質(zhì)含量比較(%)

 

注:同列不同小寫字母表示不同樣品點(diǎn)間差異**(P<0.05)。

將每個(gè)樣點(diǎn)間的人參根、莖、葉蛋白質(zhì)含量進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),除樣點(diǎn)5外,其余樣點(diǎn)根、莖、葉蛋白質(zhì)含量均存在**差異,表現(xiàn)為根>葉>莖;樣點(diǎn)5根、葉中蛋白質(zhì)含量**高于莖,根與葉的蛋白質(zhì)含量無(wú)**差異;根部蛋白質(zhì)含量為14%~15%,莖部蛋白質(zhì)含量為6%~8%,葉部蛋白質(zhì)含量為10%~14%,根部蛋白質(zhì)含量**高于葉部蛋白質(zhì)含量,葉部蛋白質(zhì)含量**高于莖部蛋白質(zhì)含量;根部與莖部蛋白質(zhì)含量在不同樣點(diǎn)間較穩(wěn)定,葉部蛋白質(zhì)含量在不同樣點(diǎn)間變化較大。

人參根、莖、葉中蛋白質(zhì)含量比較

 

不同小寫字母表示不同部位間差異**(P<0.05)

03結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明,6個(gè)采樣點(diǎn)間人參根和莖的蛋白含量無(wú)**差異,而6個(gè)采樣點(diǎn)間葉部蛋白質(zhì)含量差異**,可能是由于葉片為采樣時(shí)期的主要生長(zhǎng)組織,各植株生長(zhǎng)狀態(tài)有所不同,也可能是光照等環(huán)境因素造成的;而任一組內(nèi)蛋白質(zhì)含量個(gè)體之間無(wú)**差異;但同一人參樣品的根、莖、葉間存在**差異。

人參根蛋白質(zhì)含量**(14%~15%),其次是人參葉(10%~14%),**的是人參莖(6%~8%),但就蛋白質(zhì)總含量而言,人參根、莖、葉部分含有很高的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)成分,**開(kāi)發(fā)其深加工產(chǎn)品具有一定意義。

本試驗(yàn)采用杜馬斯燃燒法,測(cè)定了樣品中的全氮含量,而有關(guān)人參根、莖、葉中蛋白氮和非蛋白氮的檢測(cè)以及人參根、莖、葉中蛋白質(zhì)種類和藥理作用還有待進(jìn)一步研究。


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